波多野结中文版在线看,国产露脸无码A区久久,精品国产乱码久久久久久郑州公司,久久久中文久久久无码

產(chǎn)品中心PRODUCTS CENTER
技術文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術文章 > 免疫熒光應用|巨噬細胞在ibidi腔室載玻片通道載玻片中的培養(yǎng)處理

免疫熒光應用|巨噬細胞在ibidi腔室載玻片通道載玻片中的培養(yǎng)處理

更新時間:2022-09-02   更新時間:2022-09-02   點擊次數(shù):1256次

  小鼠巨噬細胞系RAW-264.7(生物安全等級2)在ibidi µ-Slides VI 0.4 和8孔腔室載玻片的培養(yǎng)方案。這是一個特殊的細胞系的例子,用于顯示粘附時間,細胞密度和細胞形態(tài)的示范。本應用可根據(jù)您的具體實驗要求進行調(diào)整。


  1.細胞培養(yǎng)與材料制備  

  在將細胞接種到玻片中之前,按照常規(guī)的方法培養(yǎng)細胞?! ?/p>

  µ-Slide VI 0.4 :通道玻片和培養(yǎng)基,在37℃和5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。這對于避免隨著時間的推移出現(xiàn)氣泡至關重要。為此,在50 ml器中填充適量的培養(yǎng)基,并輕輕地將瓶蓋擰緊。在 µ-Slide 8孔載玻片開放孔井中,氣泡可排出到大氣中?! ?/p>

  拆開µ-Slide的包裝,把它放在µ-Slide支架上,并在準備細胞懸浮液時同時將蓋子放在 Luer 適配器/孔上。


  2.播種細胞

  分離細胞:  

  吸出培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,并用PBS洗滌細胞一次。每75cm2 燒瓶中加入3-5 ml的Accutase,并將燒瓶放入培養(yǎng)箱中以加快分離速度。如果是RAW-264.7細胞系,則大約需要8分鐘。使用Accutase分離的細胞存活率更高?! ?/p>

  

1.png

  

  2.1. 將細胞接種到µ-Slide VI 0.4中  

  在µ-Slide VI 0.4建議的細胞濃度:最終細胞數(shù)  0.3 x 10 5 cells/cm2,制備濃度6 x 10 5cells/ml。通過將移液器底部直接放在通道的入口上,將30 µl細胞懸浮液填充到每個通道中。將蓋子蓋在玻片上,在37°C和5%CO2下孵育半小時以固定細胞。 

  細胞貼壁后,分別用60 µl無細胞培養(yǎng)基填充儲液池。 避免將移液器吸頭直接指向通道的入口。將玻片放回培養(yǎng)箱中?! ?/p>

  

2.png

  圖1:接種后一小時,在ibiTreat µ-Slide VI 0.4(貨號80606)中的RAW-264.7  

3.png

  圖2: 在ibiTreat µ-Slide VI 0.4中的RAW-264.7,孵育24小時后  

4.png

  圖3:在ibiTreat µ-Slide VI0.4中的RAW-264.7,培養(yǎng)四天后

  

  2.2 將細胞播種在µ-Slide 8 well 中  

  

5.png


  在µ-Slide 8 well建議的細胞濃度:最終細胞數(shù) 0.3 x 10 5 cells/cm2 ,制備濃度 1.1 x 10 5 cells/ml。將300 µl 的細胞懸浮液注入各孔中。將蓋子蓋在玻片上,在37°C和5% CO2中孵育。不需要進一步添加培養(yǎng)基。

  

6.png

  圖4:在ibiTreat µ-Slide 8 well(貨號:80826)中的RAW-264.7,播種后1小時  

7.png

  圖5: 在ibiTreat µ-Slide 8 well中的RAW-264.7,孵育24小時后

8.png

  圖6:在ibiTreat µ-Slide 8 well中的RAW-264.7,經(jīng)過四天的培養(yǎng)

  

  為獲得最佳的分布的勻的細胞,我們建議使用像µ-Slide VI 0.4 這樣的通道載玻片。在8孔腔室載玻片中,細胞密度可能會在孔的整個表面上因點而異,具體取決于細胞播種過程中的處理。

  

  3. 免疫熒光染色  

  像往常一樣為您的細胞固定和染色。  

  注意:在 µ-Slides 中染色時注意液體的處理  

  µ-Slide VI 0.4 :更換液體,先吸出兩個儲液池而不排空通道。 如果您使用的是真空設備,請注意不要將吸頭直接放在通道的入口上。 用100 µl新溶液沖洗通道3次。 從一側(cè)添加新的溶液,通過通道流入另一個儲液池,然后從另一側(cè)吸出,直到兩個儲液池都排空。注意通道永遠不要干涸!  

  µ-Slide 8孔載玻片:在 µ-Slide 8孔中,無需特殊處理措施。像在任何其他培養(yǎng)皿或孔板中一樣的交換液體。

聯(lián)


精品无码国产一区二区三区51安| 最近国语视频免费观看在线播放| 玩丰满熟妇XXXX视频| 无码粉嫩小泬无套在线观看A片| 我被六个男人躁到早上| 张开双腿疯狂迎合强壮公| 国产色欲色欲色欲.WWW| 亚洲精品一区二区三区精品| 欧美又色又爽又黄的视频| 狠狠人妻久久久久久综合九色| 无码熟妇人妻AV在线影片免费| 熟妇人妻中文字幕| 日本熟妇乱人伦XXXX| 亚洲AV无码日韩AV无码导航| 中国美女撒尿TXXXX视频偷窥| 拔萝卜视频在线观看免费播放| 无码欧精品亚洲日韩一区 | 成人自偷拍一区二区| 狠狠色噜噜狠狠狠777米奇小说| 国产精品久久久久国产三级| 成人精品一区日本无码网站| AV亚洲欧洲日产国码无码苍井空| 99久久伊人精品综合观看| 亚洲成av人片一区二区密柚| 无码H肉3D樱花动漫在线观看| 丰满护士巨好爽好大乳小说| 精品亚洲国产成人蜜臀AV| 人妻少妇出轨露脸完整版| 成人做受120视频试看| 亚洲精品无码午夜福利理论片| 夫妻之间看的视频哔哩哔哩| 超碰CAOPORON入口| 最新女人另类ZOOZ0| 亚洲精品国产精品国自产| А天堂中文最新版在线| АⅤ资源中文在线天堂| 国产AV熟女一区二区三区蜜桃| 国产成人精品一区二三区在线观看| А√天堂资源在线官网| 久久夜色精品国产噜噜麻豆| 国产成人免费无码AV在线播放|