波多野结中文版在线看,国产露脸无码A区久久,精品国产乱码久久久久久郑州公司,久久久中文久久久无码

產(chǎn)品中心PRODUCTS CENTER
技術文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術文章 > 免疫熒光應用|巨噬細胞在ibidi腔室載玻片通道載玻片中的培養(yǎng)處理

免疫熒光應用|巨噬細胞在ibidi腔室載玻片通道載玻片中的培養(yǎng)處理

更新時間:2022-09-02   更新時間:2022-09-02   點擊次數(shù):1256次

  小鼠巨噬細胞系RAW-264.7(生物安全等級2)在ibidi µ-Slides VI 0.4 和8孔腔室載玻片的培養(yǎng)方案。這是一個特殊的細胞系的例子,用于顯示粘附時間,細胞密度和細胞形態(tài)的示范。本應用可根據(jù)您的具體實驗要求進行調(diào)整。


  1.細胞培養(yǎng)與材料制備  

  在將細胞接種到玻片中之前,按照常規(guī)的方法培養(yǎng)細胞?! ?/p>

  µ-Slide VI 0.4 :通道玻片和培養(yǎng)基,在37℃和5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。這對于避免隨著時間的推移出現(xiàn)氣泡至關重要。為此,在50 ml器中填充適量的培養(yǎng)基,并輕輕地將瓶蓋擰緊。在 µ-Slide 8孔載玻片開放孔井中,氣泡可排出到大氣中?! ?/p>

  拆開µ-Slide的包裝,把它放在µ-Slide支架上,并在準備細胞懸浮液時同時將蓋子放在 Luer 適配器/孔上。


  2.播種細胞

  分離細胞:  

  吸出培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,并用PBS洗滌細胞一次。每75cm2 燒瓶中加入3-5 ml的Accutase,并將燒瓶放入培養(yǎng)箱中以加快分離速度。如果是RAW-264.7細胞系,則大約需要8分鐘。使用Accutase分離的細胞存活率更高?! ?/p>

  

1.png

  

  2.1. 將細胞接種到µ-Slide VI 0.4中  

  在µ-Slide VI 0.4建議的細胞濃度:最終細胞數(shù)  0.3 x 10 5 cells/cm2,制備濃度6 x 10 5cells/ml。通過將移液器底部直接放在通道的入口上,將30 µl細胞懸浮液填充到每個通道中。將蓋子蓋在玻片上,在37°C和5%CO2下孵育半小時以固定細胞。 

  細胞貼壁后,分別用60 µl無細胞培養(yǎng)基填充儲液池。 避免將移液器吸頭直接指向通道的入口。將玻片放回培養(yǎng)箱中?! ?/p>

  

2.png

  圖1:接種后一小時,在ibiTreat µ-Slide VI 0.4(貨號80606)中的RAW-264.7  

3.png

  圖2: 在ibiTreat µ-Slide VI 0.4中的RAW-264.7,孵育24小時后  

4.png

  圖3:在ibiTreat µ-Slide VI0.4中的RAW-264.7,培養(yǎng)四天后

  

  2.2 將細胞播種在µ-Slide 8 well 中  

  

5.png


  在µ-Slide 8 well建議的細胞濃度:最終細胞數(shù) 0.3 x 10 5 cells/cm2 ,制備濃度 1.1 x 10 5 cells/ml。將300 µl 的細胞懸浮液注入各孔中。將蓋子蓋在玻片上,在37°C和5% CO2中孵育。不需要進一步添加培養(yǎng)基。

  

6.png

  圖4:在ibiTreat µ-Slide 8 well(貨號:80826)中的RAW-264.7,播種后1小時  

7.png

  圖5: 在ibiTreat µ-Slide 8 well中的RAW-264.7,孵育24小時后

8.png

  圖6:在ibiTreat µ-Slide 8 well中的RAW-264.7,經(jīng)過四天的培養(yǎng)

  

  為獲得最佳的分布的勻的細胞,我們建議使用像µ-Slide VI 0.4 這樣的通道載玻片。在8孔腔室載玻片中,細胞密度可能會在孔的整個表面上因點而異,具體取決于細胞播種過程中的處理。

  

  3. 免疫熒光染色  

  像往常一樣為您的細胞固定和染色。  

  注意:在 µ-Slides 中染色時注意液體的處理  

  µ-Slide VI 0.4 :更換液體,先吸出兩個儲液池而不排空通道。 如果您使用的是真空設備,請注意不要將吸頭直接放在通道的入口上。 用100 µl新溶液沖洗通道3次。 從一側(cè)添加新的溶液,通過通道流入另一個儲液池,然后從另一側(cè)吸出,直到兩個儲液池都排空。注意通道永遠不要干涸!  

  µ-Slide 8孔載玻片:在 µ-Slide 8孔中,無需特殊處理措施。像在任何其他培養(yǎng)皿或孔板中一樣的交換液體。

聯(lián)


欧美精品色婷婷五月综合| 国产韩国精品一区二区三区| 宝贝把奶露出来H| 少妇BBW擦BBBB撩BBBB| 国产AV无码一区二区二三区J| 久久亚洲国产成人精品性色| 亚洲国产成人久久一区二区三区| 精品人妻无码一区二区三区淑枝| 精品人妻AV区乱码| 猫咪亚洲精品无码MV在线观看| 花蝴蝶免费看片日本| 锕锕锕锕锕锕~再深一点五种软件| 国语自产精品视频在线区| 精品国产产一区二区三区久久| 他一边曰一边吃我奶小说免看| 日韩精品中文字幕无码一区| 丰满饥渴老女人HD| 一本狠狠久久五月色丁香| 怀孕被躁到高潮的孕妇| 夜夜高潮夜夜爽夜夜爱爱一区 | 邻居少妇毛多水多太爽了| 色欲久久久天天天综合网| 女人自己扒荫道口自慰| 一 级 黄 色 片免费网站| 丰满岳乱妇三级高清| 久久精品国产亚洲AV无码麻豆| 亚洲熟妇丰满多毛XXXX高清| 久久久综合香蕉尹人综合网| 玩丰满熟妇XXXX视频| 两个奶被男人揉了一个晚上| H无码里番肉片在线观看的| 久久久久久精品免费免费999| 99无码人妻一区二区三区免费| 小寡妇高潮流白浆A片| AV在线亚洲欧洲日产一区二区 | 精品国产乱码久久久久久郑州公司 | 一本久道久久综合狠狠躁| 国产精品亚洲精品日韩已方| 国产精品日本一区二区在线播放| 蜜桃AV无码免费看永久| 两女女百合互慰AV赤裸无遮挡|